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本制品是由Es Taq DNA Polymerase、Mg²⁺、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。Es Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，超过98%的PCR扩增能一次成功，同时复杂模板也能得到有效扩增，并可最大限度地减少人为误差和污染。本制品不含染料，PCR程序结束后可根据需要加入适量上样缓冲液后进行电泳操作。扩增得到的大部分PCR产物3′端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验，PCR扩增产物专用于聚丙烯酰胺凝电泳检测。

• 经检验无外源核酸酶活性；
  
• PCR方法检测无宿主残余DNA；
  
• 能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

• PCR反应体系
  

  成分	用量	终浓度
  2×Es Taq MasterMix(for Dye)	25μL	1×
  Forward Primer,10μM	2μL	0.4μM
  Reverse Primer,10μM	2μL	0.4μM
  Template DNA	＜0.5μg	＜0.5μg/50μL
  ddH2O	至50μL

  注：引物浓度请以终浓度0.1～1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
  
• PCR反应条件
  

  步骤	温度	时间	循环数
  预变性	94℃	2min	1
  变性	94℃	30 s	25～35
  退火	55～65℃	30 s
  延伸	72℃	30 s
  终延伸	72℃	2min	1

  注：
  
  • 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
    
  • 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Es Taq DNA Polymerase的扩增效率为2kb/min。
    
  • 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。